因業(yè)務(wù)調(diào)整，部分個人測試暫不接受委托，望見諒。

檢測項(xiàng)目

病毒基因組測序、外殼蛋白免疫分析、核酸雜交檢測、RT-PCR擴(kuò)增、qRT-PCR定量分析、dsRNA分離鑒定、寄主范圍測定、癥狀學(xué)觀察、組織病理切片、病毒粒子電鏡觀察、血清學(xué)交叉反應(yīng)測試、傳播媒介鑒定、溫度敏感性試驗(yàn)、抗血清效價測定、核酸探針設(shè)計優(yōu)化、引物特異性驗(yàn)證、系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建、重組蛋白表達(dá)純化、單克隆抗體制備、病毒分離培養(yǎng)、接種體活性測試、潛伏期監(jiān)測、病害嚴(yán)重度分級、環(huán)境適應(yīng)性評估、抗病品種篩選、分子標(biāo)記開發(fā)、核酸提取效率驗(yàn)證、假陽性排除實(shí)驗(yàn)、交叉保護(hù)試驗(yàn)、基因組重組分析。

檢測范圍

梨樹葉片樣本、枝條潰瘍組織、果實(shí)表皮病斑、砧木形成層樣本、根部韌皮部提取物、花芽滲出液、嫁接接口愈傷組織、花粉懸浮液、種子胚乳切片、土壤浸出液樣本、灌溉水過濾濃縮物、修剪工具表面拭子、昆蟲介體（如蚜蟲/葉蟬）整體勻漿液、鳥類排泄物樣本、氣傳孢子捕捉樣本、苗圃基質(zhì)培養(yǎng)物、冷藏貯藏果實(shí)樣本、離體組培苗莖尖分生組織樣本、葉脈透明化處理樣本、木質(zhì)部汁液離心沉淀物、樹皮刮取物超薄切片樣本、果園周邊雜草根系樣本、花粉管顯微穿刺樣本、病健交界處過渡區(qū)組織塊樣本組培苗培養(yǎng)基濾膜殘留物樣本。

檢測方法

反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）：通過設(shè)計特異性引物擴(kuò)增病毒RNA依賴的RNA聚合酶基因保守區(qū)段，靈敏度可達(dá)10拷貝/μl。

雙抗體夾心ELISA：采用多克隆抗體包被微孔板捕獲病毒顆粒，酶標(biāo)單抗顯色定量分析，適用于大批量樣品初篩。

免疫膠體金試紙條：基于納米金標(biāo)記抗體與病毒外殼蛋白的快速結(jié)合反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)田間現(xiàn)場15分鐘快速診斷。

透射電子顯微鏡（TEM）：負(fù)染法觀察直徑28-32nm的二十面體病毒粒子形態(tài)特征。

二代測序（NGS）：宏基因組學(xué)方法對病組織總RNA進(jìn)行深度測序，通過生物信息學(xué)比對確認(rèn)病毒全基因組序列。

分子信標(biāo)探針技術(shù)：設(shè)計5'端淬滅基團(tuán)與3'端熒光基團(tuán)的莖環(huán)結(jié)構(gòu)探針，實(shí)現(xiàn)qPCR過程中實(shí)時特異性檢測。

雙向電泳-質(zhì)譜聯(lián)用：分離純化病毒蛋白后進(jìn)行MALDI-TOF分析，比對數(shù)據(jù)庫確認(rèn)外殼蛋白特征肽段。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

GB/T35342-2017植物病毒檢疫鑒定方法梨皰潰瘍病毒

SN/T5559-2022進(jìn)出境植物檢疫梨皰潰瘍病毒實(shí)時熒光RT-PCR檢測方法

EPPOPM7/151(1)Pearblistercankerviroid診斷規(guī)程

ISO16140-3:2021微生物學(xué)方法驗(yàn)證第3部分：植物病原體分子檢測協(xié)議驗(yàn)證

NY/T401-2000果樹無病毒母本樹和苗木檢疫規(guī)程

GB/T28068-2011柑桔潰瘍病菌檢疫鑒定方法（參考條款）

ISPM27國際植物檢疫措施標(biāo)準(zhǔn)診斷規(guī)程制定準(zhǔn)則

T/CATCM011-2020中藥材病蟲害分子檢測技術(shù)規(guī)范

AOACOfficialMethod2008.09PlantVirusDetectionUsingReal-TimePCR

AS5011.15-2004食品微生物學(xué)第15部分：植物病原體的檢測與計數(shù)（通用原則）

檢測儀器

實(shí)時熒光定量PCR儀：ABIQuantStudio系列設(shè)備支持TaqMan探針法實(shí)現(xiàn)病毒核酸絕對定量分析。

全自動核酸提取工作站：MagMAXTM系統(tǒng)通過磁珠法完成96孔板高通量RNA純化。

酶標(biāo)儀：BioTekSynergyH1具備450nm/630nm雙波長吸光度讀取功能。

超薄切片機(jī)：LeicaUC7制備80nm厚度的包埋組織切片用于電鏡觀察。

冷凍離心機(jī)：Eppendorf5430R實(shí)現(xiàn)4℃條件下病毒顆粒的梯度離心富集。

生物分子相互作用儀：BiacoreT200通過表面等離子共振技術(shù)測定抗體親和力常數(shù)。

超低溫冰箱：ThermoScientificTSX系列維持-80℃長期保存病毒分離株。

全自動電泳系統(tǒng)：Agilent4200TapeStation進(jìn)行核酸完整性及濃度質(zhì)控分析。

檢測流程

1、咨詢：提品資料(說明書、規(guī)格書等)

2、確認(rèn)檢測用途及項(xiàng)目要求

3、填寫檢測申請表(含公司信息及產(chǎn)品必要信息)

4、按要求寄送樣品(部分可上門取樣/檢測)

5、收到樣品，安排費(fèi)用后進(jìn)行樣品檢測

6、檢測出相關(guān)數(shù)據(jù)，編寫報告草件，確認(rèn)信息是否無誤

7、確認(rèn)完畢后出具報告正式件

8、寄送報告原件